Dioctophymosis in a free-ranging maned wolf (Chrysocyon brachyurus): clinical-therapeutic, ultrasonographic and pathological aspects - case report / [Dioctofimose em um lobo guará (Chrysocyon brachyurus) de vida livre: aspectos clínico-terapêuticos, ultrassonográficos e patológicos - relato de caso]

Dioctophymosis is the disease caused by Dioctophyma renale, a large nematode, popularly known as giant kidney worm, and whose definitive hosts are the domestic dog and many wild mammal species. There are some reports of maned wolf parasitism by D. renale, however, in most cases the reports are restricted to the finding of the parasite during necropsy, without clinical assessment. The present report aimed to describe the clinical-therapeutic, ultrasonographic and pathological aspects of D. renale parasitism in a free-ranging maned wolf, emphasizing the treatment with an association of doramectin, praziquantel, pyrantel pamoate, and febantel that resulted in complete elimination of the parasite.(AU)

A dioctofimose é a doença causada pelo Dioctophyma renale, um nemátodo grande, popularmente chamado de verme gigante do rim e que tem como hospedeiro definitivo o cão doméstico e inúmeras espécies de mamíferos silvestres. Existem alguns relatos do parasitismo do lobo-guará por D. renale, contudo, na maioria das vezes, os relatos se restringem apenas ao achado do parasita durante a necropsia, sem a correlação clínica. O presente relato objetiva descrever os aspectos clínico-terapêuticos, ultrassonográficos e patológicos do parasitismo por D. renale em um lobo-guará de vida livre, enfatizando o tratamento com uma associação de doramectina, praziquantel, pamoato de pirantel e febantel, o que resultou na eliminação completa do parasita.(AU)

Extranodal lymphoma in a bush dog (Speothos venaticus) - case report / Linfoma extranodal em um cachorro-do-mato-vinagre (Speothos venaticus) - relato de caso

A captive 7-year-old male bush dog (Speothos venaticus) was diagnosed with lymphoma affecting the kidneys, adrenal glands, liver, and spleen. The animal developed renal failure and was euthanized due to poor prognosis. Grossly, both kidneys were enlarged with multiple nodules. Histologically, the neoplasm was an infiltrative and poorly demarcated round cell tumor. Two morphologically distinct cell populations were observed, smaller cells with a lymphocytic morphology, and another population of larger and pleomorphic cells. Most of the smaller cell population, approximately 40% of the population within the neoplasm, were CD3 positive. Neoplastic cells were CD45, CD11d, and granzime B positive, and negative for CD20, CD79a, PAX5, CD163, and myeloperoxidase. This is the first reported case of lymphoma in a bush dog. This report demonstrated the suitability of several cell surface markers for differential diagnosis of round cell tumors in this species.(AU)

Um cachorro-do-mato-vinagre (Speothos venaticus), de sete anos de idade, mantido em cativeiro, foi diagnosticado com linfoma que havia afetado os rins, as adrenais, o fígado e o baço. O animal desenvolveu insuficiência renal e foi submetido à eutanásia devido ao prognóstico desfavorável. Macroscopicamente, ambos os rins estavam aumentados de tamanho, com múltiplos nódulos. Histologicamente, a neoplasia era infiltrativa, pobremente delimitada e constituída por células redondas. Duas populações distintas foram observadas: células pequenas com morfologia linfocítica e células grandes e pleomórficas. A maior parte da população de células pequenas, correspondendo a aproximadamente 40% da população celular na neoplasia, foi positiva para CD3. As células neoplásicas foram positivas para CD45, CD11d e granzima B e negativas para CD20, CD79a, PAX5, CD163 e mieloperoxidase. Este é o primeiro caso de linfoma em um cachorro-do-mato-vinagre. Tal relado demonstra a utilidade de vários marcadores de superfície celular para o diagnóstico diferencial de tumores de células redondas nessa espécie.(AU)

Malignant pancreatic gastrinoma in a maned wolf (Chrysocyon brachyurus): case report / Gastrinoma pancreático maligno em lobo-guará (Chrysocyon brachyurus): relato de caso

A captive 12-year-old female maned wolf (Chrysocyon brachyurus), previously diagnosed with visceral leishmaniasis, developed severe myiasis in the right ear, followed by prostration and death. A firm solid nodule, measuring 1 x 3cm, was grossly observed in the pancreas. Histologically, there was neoplastic proliferation in the pancreas and pancreatic lymph node. Neoplastic cells had a neuroendocrine pattern, and were positive for gastrin and pancreatic polypeptide by immunohistochemistry. The wolf had also ulcerative gastritis. To the best of our knowledge is the first reported case gastrinoma in this species.(AU)

Uma fêmea lobo-guará de cativeiro (Chrysocyon brachyurus), diagnosticada previamente com leishmaniose visceral, desenvolveu miíase grave na orelha direita, seguida por prostação e morte. Um nódulo sólido, firme e medindo 1 x 3cm, foi macroscopicamente observado no pâncreas. Histologicamente, observou-se proliferação neoplásica no pâncreas e linfonodo pancreático. As células neoplásicas tinham um padrão neuroendócrino e foram positivas para gastrina e polipeptideo pancreático por imuno-histoquímica. A loba tinha também gastrite ulcerativa. Este é o primeiro caso descrito de gastrinoma nessa espécie.(AU)

Endometrial transcription of microbial molecular patterns receptors in Gyr and F1 Holstein x Gyr postpartum cows / Transcrição endometrial de receptores de padrões moleculares microbianos em vacas Gir e F1 Holandês x Gir após o parto

Zebu and Holstein x Zebu crossbred have low incidence of uterine infection when compared to Holstein cows. Resistance to uterine infections may be associated with the ability to recognize invading microorganisms. Endometrial transcription of microbial molecular patterns receptors has been investigated in the postpartum period of Holstein cows, but it is completely unknown in Zebu or Holstein x Zebu cows. In this study, 9 Gyr and 12 F1 Holstein x Gyr cows were submitted to endometrial biopsies at the first and seventh days postpartum, with the objective to measure transcription levels of toll-like receptors (TLRs) 1/6, 2, 4, 5, and 9; nucleotide-binding oligomerization domain (NOD)-like receptors 1 and 2; and coreceptors cluster of differentiation 14 (CD14) and myeloid differentiation protein-2 (MD-2). There was a significant (P<0.05) decrease in transcription of TLR5 in Gyr, and an increase in transcription of TLR9 in F1 cows, between the first and seventh day postpartum. Both groups had low incidences of uterine infections up to 42 days postpartum. Uterine involution completed at 27.7 ± 10.1 and 25.1 ± 4.7 days postpartum for Gyr and F1 cows, respectively. In Gyr cows, higher transcription levels of TLR1/6 and NOD1 correlated to a longer period required for uterine involution. In F1 cows, lower levels of TLR1/6, TLR2 and NOD2 correlated to a longer period required for uterine involution. In conclusion, some pathogen recognition receptors associated significantly with the time required for uterine involution in Gyr and F1 cows.(AU)

Vacas Zebu e mestiças Holandês x Zebu apresentam baixas incidências de infecções uterinas quando comparadas às Holandesas. A resistência às infecções uterinas pode estar relacionada com a capacidade de reconhecimento dos microrganismos invasores. A transcrição endometrial de receptores de padrões moleculares microbianos tem sido investigada em vacas Holandesas recém-paridas, porém ainda é desconhecida em vacas Zebu e mestiças Holandês x Zebu. No presente estudo, nove vacas Gir e 12 F1 Holandês x Gir foram submetidas a biópsias endometriais no primeiro e no sétimo dia após o parto, com o objetivo de mensurar os níveis de transcrição gênica dos receptores tipo Toll (TLRs) 1/6, 2, 4, 5 e 9; receptores tipo NOD 1 e 2; e dos coreceptores CD14 e MD-2. Houve diminuição significativa (P < 0,05) do nível de transcrição de TLR5 em vacas Gir e aumento da transcrição de TLR9 em vacas F1, entre o primeiro e o sétimo dia após o parto. Os dois grupos apresentaram baixas incidências de infecções uterinas até 42 dias pós-parto. O período de involução uterina foi de 27,7 ± 10,1 e 25,1 ± 4,7 dias pós-parto, para vacas Gir e F1, respectivamente. No grupo de vacas Gir, altos níveis de transcrição de TLR1/6 e NOD1 tiveram correlação significativa com o prolongamento do período de involução uterina. No grupo de vacas F1, baixos níveis de transcrição de TLR1/6, TLR2 e NOD2 foram associados a maiores períodos de involução uterina. Portanto, os níveis de transcrição endometrial de alguns receptores de padrões moleculares microbianos na primeira semana após o parto podem estar relacionados com o tempo requerido para ocorrência da involução uterina em vacas Gir e F1.(AU)

Tuberculosis Caused by Mycobacterium bovis in a Capybara (Hydrochoerus hydrochaeris).

Tuberculosis, associated with Mycobacterium bovis, was diagnosed post mortem in an adult female capybara (Hydrochoerus hydrochaeris), kept at the Pampulha Ecological Park, Belo Horizonte, Brazil, in a large metropolitan area. On post-mortem examination, there were numerous firm white nodules scattered throughout all lobes of both lungs. Tissue samples were collected for histological and microbiological examination. Microscopically, the pulmonary nodules were multifocal to coalescing granulomas and intralesional acid-fast bacilli were evident in Ziehl-Neelsen-stained sections of the lung and spleen. Colonies with morphological features of Mycobacterium spp. were isolated from lung samples and conventional polymerase chain reaction (PCR) with genomic DNA from the isolates was positive for M. bovis; sequencing indicated 100% identity with the region of difference 4 (RD4) of M. bovis. In addition, M. bovis DNA was detected in the lung by quantitative PCR. The finding of M. bovis in a capybara indicates a potential public health risk in a zoological collection.

Clinical and pathological presentation of squamous metaplasia of the rete ovarii in a Zebu cow / Apresentação clínica e patológica de um caso de metaplasia escamosa da rete ovariana em vaca Zebu

Squamous metaplasia of rete ovarii is characterized by replacement of the normal cuboidal epithelium of rete ovarii by a keratinized stratified scamous epithelium, leading to accumulation of keratinized material within the tubules and cystic dilatation of rete ovarii. The present study decribes a case of scamous metaplasia of rete ovarii in a 10 year old Zebu cow, including clinical, surgical, ultrasonographic, histopathological and hormonal findings. At first ultrasound examination the cow had lightly asymmetric ovaries with follicles presenting echogenicity similar to luteinized follicular cysts. After transvaginal follicular aspiration creamy yellowish sanguineous-purulent content was recovered. After unilateral ovariectomy the ovary was sectioned and brownish viscous material drained from cystic cavity. Histopathology confirmed the diagnosid of squamous metaplasia of the rete ovarii. Progesterone concentrations assessed by chemiluminescent enzyme immunoassay within different time periods after ovariectomy showed that pathology did not compromise normal luteal ovarian activity in a contralateral reminiscent ovary.

A metaplasia escamosa de rete ovarii é caracterizada pela substituição do epitélio cúbico normal da rete ovarii por um epitélio escamoso estratificado queratinizado, levando ao acúmulo de material queratinizado dentro dos túbulos e à dilatação cística da rete ovarii. O presente estudo descreve um caso de metaplasia escamosa de rete ovarii em uma vaca Zebu de aproximadamente 10 anos, incluindo aspectos clínico, cirúrgico, ultrassonográfico, histopatológico e dos achados hormonais. Ao primeiro exame ultrassonográfico, a vaca tinha ovários levemente assimétricos e com folículos apresentando ecogenicidade semelhante à dos cistos foliculares luteinizados. Após a aspiração folicular por via transvaginal, foi recuperado conteúdo sanguinopurulento amarelado e de aspecto cremoso. Após a ovariectomia unilateral, o ovário foi seccionado, permitindo a drenagem de material de aspecto viscoso amarronzado da cavidade cística. A histopatologia confirmou o diagnóstico de metaplasia escamosa da rete ovarii. As concentrações de progesterona avaliadas por quimioluminescência, em diferentes períodos de tempo após a ovariectomina unilateral, mostrou que a patologia não comprometeu a atividade ovariana normal do ovário contralateral remanescente.

Modelo experimental de endometrite em vacas inoculadas com Escherichia coli inativada por meio de infusão uterina / Endometritis experimental model in cows inoculated with inactivated Escherichia coli by uterine infusion

The aim of this study was to evaluate the endometrial inflammatory response of nine Zebu cows inoculated through uterine infusion with 30 mL of inactivated Escherichia coli suspension (1 x 109 UFC/mL) and nine with 30 mL of sterile phosphate buffered saline. Endometrial biopsies were performed before and after the inoculations during estrus, and ten days later in the diestrus phase. Neutrophilic infiltrates were observed in 88.8% of samples from the E. coli group in estrus phase and demonstrated different degrees of endometrial inflammation. This study characterizes a suitable model for studying endometritis in cattle.(AU)

Real-time PCR for detection of Brucella ovis and Histophilus somni in ovine urine and semen / PCR em tempo real para detecção de Brucella ovis e Histophilus somni em urina e sêmen ovino

A epididimite infecciosa ovina é uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de sêmen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas espécie-específicos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensível, uma vez que a amplificação de DNA ocorreu com até 0,2ng de DNA/reação. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificação inespecífica foi observada. A aplicabilidade da técnica em amostras biológicas também foi confirmada, pois não houve perda de eficácia (P>0,05) quando comparada à PCR convencional com amostras de sêmen e urina de carneiros experimentalmente infectados.

Molecular characterization of neuropathogenic Equine Herpesvirus 1 Brazilian isolates / Caracterização molecular de isolados brasileiros de herpesvírus equino 1

Este trabalho descreve a caracterização molecular de oito amostras de herpesvírus equino 1 isoladas do sistema nervoso central de equinos que morreram com sinais neurológicos no estado de Minas Gerais. As amostras de EHV-1 foram isoladas em cultivo celular, e a caracterização molecular foi feita por genotipagem e identificação do marcador neuropatogênico por meio das técnicas de PCR, restrição enzimática e sequenciamento. A caracterização molecular desses isolados pode ser a base para o desenvolvimento de novas formulações vacinais com maior eficácia para a prevenção de doença neurológica causada pelo EHV-1.(AU)

Dermatosparaxis in two White Doper lambs in Brazil: case report / Dermatosparaxis em dois cordeiros White Dorper no Brasil: relato de caso

Dermatosparaxis is a genetic disease that affects collagen maturation. This disease is characterized by marked impairment of the resistance of collagen fibers that leads to skin fragility, and it may affect several species. This is the first report of dermatosparaxis in sheep in Brazil. Clinically, two White Dorper lambs had multiple skin lacerations in the neck, dorsum and limbs. Transmission microscopy demonstrated irregular collagen fibers arranged in hieroglyphic shape and scanning electron microscopy demonstrated thin collagen fibrils that were not arranged in bundles as observed in the normal dermis. These findings are consistent with the diagnosis of dermatosparaxis.

A dermatosparaxis é uma doença genética que afeta a maturação do colágeno. Essa doença é caracterizada por redução acentuada da resistência das fibras colágenas que leva à fragilidade da pele. Esse é o primeiro relato de dermatosparaxis em ovinos no Brasil. Clinicamente, dois cordeiros da raça White Dorper tiveram múltiplas lacerações na pele do pescoço, dorso e membros. A microscopia de transmissão demonstrou fibras de colágeno irregularares arranjadas em formato de hieroflifo, e a microscopia de varredura demonstrou fibras finas de colágeno não arranjadas em bandas como na derme do animal normal. Esses achados são consistentes com o diagnóstico de dermatosparaxis.

Diagnóstico etiológico de enfermidades do sistema nervoso central de equinos no Estado de Minas Gerais, Brasil / Etiologic diagnosis of diseases of the central nervous system of horses in Minas Gerais State, Brazil

O Brasil possui o quarto maior rebanho equino do mundo, e o Estado de Minas Gerais detém o maior número de equinos do país. Portanto, um diagnóstico preciso das doenças neurológicas dos equinos é prioridade no estado. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi identificar, utilizando a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), os agentes infecciosos responsáveis por enfermidades que afetam o sistema nervoso central (SNC) de equinos. De janeiro de 2009 a janeiro de 2011, foi realizado um levantamento dos casos de encefalites e encefalomielites em equinos no Estado de Minas Gerais, utilizando-se amostras de SNC de equinos que morreram com sinais neurológicos. Das 217 amostras de SNC, 47 (21,7%) foram positivas para o vírus da raiva pelo método de imunofluorescência indireta e inoculação em camundongos. Nas 170 amostras negativas para o vírus da raiva, o herpes-vírus equino-1 (EHV-1) foi diagnosticado em 20 (11,8%) e o herpes-vírus suíno-1 (SHV-1), em uma amostra por meio de PCR, e o vírus encefalite de Saint Louis (SLEV), em outra amostra, através de transcrição reversa (RT) e PCR (RT-PCR). Constatou-se que o vírus da raiva é o principal agente causador de encefalite em equinos, apesar do crescente número de casos de encefalomielite associados ao EHV-1 no Estado de Minas Gerais.(AU)

Brazil has the fourth largest equine herd in the world and the State of Minas Gerais has the largest equine population in the country. Therefore, an accurate diagnosis of cases of neurologic diseases is a priority in Minas Gerais. The aim of this study was to identify by Polymerase Chain Reaction (PCR) infectious agents associated with neurological disease in the central nervous system (CNS) of horses. A survey of encephalitis and encephalomyelitis in horses in Minas Gerais State was performed on samples of CNS from horses that died with neurological signs from January 2009 to January 2011. Forty seven CNS samples from 217 (21.7%) horses were positive for rabies virus by the indirect immunofluorescence assay and mouse inoculation. Among the 170 samples that were negative for rabies, EHV-1 was detected in 20 (11.8%) and the swine herpesvirus-1 (SHV-1) was detected in one sample by PCR, and the Saint Louis encephalitis virus (SLEV) was identified in another sample by reverse transcription (RT) and PCR (RT-PCR). Rabies virus is the most common causative agent of encephalitis in horses, despite the increasing number of cases of encephalitis associated with EHV-1 in the State of Minas Gerais.(AU)

Indirect ELISA for diagnosis of Brucella ovis infection in rams / ELISA indireto para diagnóstico da infecção por Brucella ovis em carneiros

Brucella ovis is a major cause of epididymitis in sexually mature rams, resulting in subfertility, infertility, and economic losses for the sheep industry worldwide. The aim of this study was to develop an indirect ELISA (iELISA) using recombinant proteins, namely rBoP59 and rBP26, as antigens for serological diagnosis of B. ovis infection. The BoP59 and BP26 recombinant proteins were expressed in E. coli and purified by affinity chromatography. Antigenicity was tested by Western blot and iELISA. Standardization of iELISA was performed with 500ng and 1µg BoP59 and rBP26 per well, testing serum from uninfected and experimentally infected rams. rBP26 was effective in distinguishing positive from negative rams. The rBP26 iELISA developed in this study is the first to use a completely purified rBP26 as antigen resulting in high sensitivity (100%) and specificity (90.2%), and an overall accuracy equal to 1.0...

Brucella ovis é uma das principais causas de epididimite em carneiros sexualmente maduros, resultando em subfertilidade e infertilidade e consequentes perdas econômicas para a ovinocultura em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi desenvolver ELISA indireto (ELISAi), utilizando como antígeno proteínas recombinantes BoP59r e BP26r para diagnóstico da infecção por B. ovis. BoP59r e BP26r foram expressas em E. coli e purificadas por cromatografia de afinidade e a antigenicidade testada por Western blot e ELISAi. A padronização do ELISAi foi realizada testando 500 ng e 1 µg de BoP59r e BP26r por poço e soros de carneiros infectados e não infectados. A BP26r foi eficiente em diferenciar ovinos negativos de positivos. O ELISAi com BP26 desenvolvido neste estudo foi o primeiro a utilizar BP26 completamente purificada como antígeno, resultando em elevada sensibilidade (100%) e sensibilidade (90,2%), com acurácia igual a 1,0...

Cutaneous toxoplasmosis in an immunosuppressed dog / Toxoplasmose cutânea em um cão imunosuprimido

A seven-year-old female spayed Schnauzer was presented with cutaneous ulcerated nodular lesions shortly after the beginning of an immunosuppressive treatment for immune-mediated hemolytic disease. Cytology was performed and a great number of neutrophils and banana-shaped organisms were observed. Biopsy showed a neutrophilic and histiocytic dermatitis and panniculitis with myriads of intralesional bradyzoites cysts and tachyzoites. PCR analysis was positive for Toxoplasma gondii and negative for Neospora caninum. Immunohistochemistry confirmed intralesional T. gondii antigens. This study reports a rare case of cutaneous toxoplasmosis in an immunosuppressed dog...

Uma cadela Schnauzer, castrada, de sete anos apresentou lesões cutâneas nodulares ulceradas pouco tempo após início de tratamento imunossupressor para doença hemolítica imunomediada. Foi realizado exame citológico, e um grande número de neutrófilos e estruturas em forma de banana foi observado. Biópsia mostrou dermatite e paniculite neutrofílica e histiocítica com miríades de taquizoítos e cistos de bradizoítos intralesionais. PCR foi positivo para Toxoplasma gondii e negativo para Neospora caninum. Imuno-histoquímica confirmou antígenos de T. gondii intralesionais. Este trabalho relata um caso raro de toxoplasmose cutânea em um cão imunossuprimido...

Aspectos reprodutivos e produtivos de vacas da raça Holandesa com puerpério normal ou patológico / Reproductive and productive parameters of Holstein cows with normal or pathological puerperium

Foram avaliadas 103 vacas da raça Holandesa de primeira, segunda ou terceira ordens de lactação, com o objetivo de comparar aspectos reprodutivos e produtivos dos animais com puerpério normal ou patológico. Exames ginecológicos foram realizados semanalmente, do parto ao final do puerpério, por meio de palpação transretal, ultrassonografia e vaginoscopia. As incidências de partos gemelares, partos auxiliados, retenção de placenta e infecções uterinas até o primeiro serviço foram de 11,7%, 20,4%, 38,8% e 75%, respectivamente. A involução uterina e a primeira ovulação ocorreram aos 33,5±11,1 e 43,6±21,5 dias após o parto, respectivamente, com diferenças (P<0,001) entre vacas com ou sem infecção uterina. O primeiro serviço ocorreu aos 75,9±31,0 dias após o parto e a taxa de gestação foi de 20,7%. A produção de leite diária foi de 27,9±7,3 litros por vaca até 42 dias após o parto. O prejuízo com a redução na produtividade e o descarte do leite contaminado com resíduos de antibiótico foi equivalente a 598 litros de leite por vaca com retenção de placenta e infecção uterina. A alta incidência de transtornos puerperais interferiu na fertilidade e na produção de leite, causando elevado impacto econômico para a propriedade.

The study was performed with 103 Holstein cows of first, second or third orders of lactation, and aimed to compare reproductive and productive parameters of animals with normal or pathological puerperium. Uterine and ovarian examinations were performed weekly until 42 days after parturition, by rectal palpation, vaginoscopy and ultrasonography. The incidence of twin pregnancies, assisted births, retained placenta, and uterine infection until the first service, were 11.7%, 20.4%, 38.8% and 75%, respectively. Uterine involution and detection of the first corpus luteum occurred at 33.5±11.1 and 43.6±21.5 days after parturition, respectively, and differed (P<0.01) between cows with or without uterine infection. The first artificial insemination occurred in average at 75.9±31.0 days after parturition, and the pregnancy rate was 20.7%. Average daily milk yield was 27.9±7.3 liters/cow until 42 days after parturition. Financial losses related to decreased milk production and discarding of milk contaminated with antibiotic residues corresponded to 598 liters of milk/cow presenting retained placenta and uterine infection. The high incidence of puerperal diseases negatively affected the fertility and milk production, causing large economic impact to the milk production system.

Species-specific nested PCR as a diagnostic tool for Brucella ovis infection in rams / Nested PCR espécie-específica para o diagnóstico da infecção por Brucella ovis em carneiros

The aim of the present study was to evaluate a species-specific nested PCR based on a previously described species-specific PCR for detection of B. ovis in semen and urine samples of experimentally infected rams. The performance of the species-specific nested PCR was compared with the results of a genus-specific PCR. Fourteen rams were experimentally infected with the Brucella ovis REO 198 strain and samples of semen and urine were collected every week up to 180 days post infection. Out of 83 semen samples collected, 42 (50.6%) were positive for the species-specific nested PCR, and 23 (27.7%) were positive for the genus-specific PCR. Out of 75 urine samples, 49 (65.3%) were positive for the species-specific nested PCR, whereas 11 (14.6%) were genus-specific PCR positive. Species-specific nested PCR was significantly more sensitive (P<0.001) than the genus-specific PCR in semen and urine from experimentally infected rams. In conclusion, the species-specific nested PCR developed in this study may be used as a diagnostic tool for the detection of B. ovis in semen and urine samples from suspected rams.

O presente estudo objetivou avaliar uma técnica de nested PCR espécie-específica delineada a partir de PCR espécie-específica descrita anteriormente para detecção de B. ovis em sêmen e urina de carneiros infectados experimentalmente. O desempenho da nested PCR espécie-específica foi comparado com os resultados de uma PCR gênero-específica. Quatorze carneiros foram infectados experimentalmente com Brucella ovis REO 198 e amostras de sêmen e de urina foram colhidas semanalmente até 180 dias após a infecção. De 83 amostras de sêmen, 42 (50,6%) foram positivas pela nested PCR espécie-específica, e 23 (27,7%) foram positivas pela PCR gênero-específica. De 75 amostras de urina, 49 (65,3%) foram positivas pela nested PCR espécie-específica, enquanto 11 (14,6%) foram positivas em PCR gênero-específica. A técnica de nested PCR espécie-específica foi significativamente mais sensível (P<0,001) do que a PCR gênero-específica no sêmen e na urina de carneiros infectados experimentalmente. Em conclusão, a nested PCR espécie-específica desenvolvida neste estudo pode ser utilizada como ferramenta de diagnóstico para detecção de B. ovis em sêmen e urina de carneiros suspeitos.

Monocyte-derived macrophages from Zebu (Bos taurus indicus) are more efficient to control Brucella abortus intracellular survival than macrophages from European cattle (Bos taurus taurus).

Brucellosis is one of the most important zoonotic diseases in the world. Considering its strict zoonotic nature, understanding of the pathogenesis and immunity of Brucella spp. in natural animal hosts is essential to prevent human infections. Natural resistance against brucellosis has been demonstrated in cattle, and it is associated with the ability of macrophages to prevent intracellular replication of Brucella abortus. Identification of breeds that are resistant to B. abortus may contribute for controlling and eradicating brucellosis in cattle. This study aimed to compare macrophages from Nelore (Bos taurus indicus) or Holstein (Bos taurus taurus) regarding their resistance to B. abortus infection. Macrophages from Nelore were significantly more efficient in controlling intracellular growth of B. abortus when compared to Holstein macrophages even under intralysosomal iron restricting conditions. Furthermore, Nelore macrophages had higher transcription levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and TNF-α at 12h post-infection (hpi) and higher levels of IL-12 at 24 hpi when compared to Holstein macrophages. Conversely, Holstein macrophages had higher levels of IL-10 transcripts at 24 hpi. Macrohages from Nelore also generated more nitric oxide (NO) in response to B. abortus infection when compared to Holstein macrophages. In conclusion, cultured Nelore macrophages are more effective in controlling intracellular replication of B. abortus, suggesting that Nelore cattle is likely to have a higher degree of natural resistance to brucellosis than Holstein.

Diagnosis of Brucella ovis infection by serology and PCR in urine samples from naturally infected rams in the state of Piauí / Diagnóstico da infecção por Brucella ovis por sorologia e reação em cadeia pela polimerase (PCR) em amostras de urina de carneiros naturalmente infectados no estado do Piauí

A brucelose ovina causada pela Brucella ovis é uma doença reprodutiva de carneiros caracterizada por epididimite, orquite, com consequente diminuição da fertilidade e prejuízos econômicos significativos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a aplicabilidade da técnica de PCR como um método de diagnóstico em campo, comparado-a com a técnica de IDGA. Foram coletadas amostras de urina e soro de 90 carneiros oriundos de 31 rebanhos localizados no Estado do Piauí. Quatro das 31 (12,9%) propriedades avaliadas apresentaram animais positivos. Dezoito (20%) amostras de urina foram positivas pela PCR, enquanto o método de IDGA identificou 16 (17,8%) carneiros soropositivos. Embora os métodos tenham apresentado concordância baixa na estatística Kappa (k=0,04), não foi observada diferença estatística entre as técnicas (P>0,05) pelo teste exato de Fisher. A combinação dos dois testes aumentou significativamente a detecção de animais positivos para 34,4% (P <0,05), sugerindo que a associação de métodos de diagnóstico como a técnica de PCR em amostras de urina e sorologia por IDGA e a avaliação clínica dos animais é necessária para um diagnóstico eficiente na infecção por B. ovis.

Chronic intestinal pseudo-obstruction in a dog: case report / Pseudo-obstrução intestinal crônica em um cão: relato de caso

Intestinal pseudo-obstruction is a rare disorder that affects gastrointestinal propulsion. It may be secondary to several pathological conditions or it may develop without a known cause. A 1.2 year-old intact Pug bitch had a history of vomiting and constipation, which were followed by diarrhea and distended abdomen. Hypomotility and dilation of the small intestine, which was filled with gas, were observed during laparotomy. Histologically, full thickness biopsy specimens demonstrated a severe loss and degeneration of leiomyocytes in the inner and outer muscular layers of the intestinal wall, whereas there was a marked hypertrophy and hyperplasia of smooth muscle cells in the lamina propria, and extremely thickened muscularis mucosae arranged in bundles oriented in different directions with marked hypertrophy and hyperplasia of leiomyocytes. Distribution of leiomyocytes was further characterized by immunohistochemistry. These findings support the diagnosis of intestinal pseudo-obstruction in a Pug, associated with degeneration and loss of leiomyocytes in the muscular layer.

A pseudo-obstrução intestinal é um distúrbio raro que afeta a propulsão gastrointestinal. Pode ser secundária a diversas condições patológicas ou pode ser idiopática. Uma cadela Pug de um ano e dois meses de idade apresentou histórico de vômitos e constipação, que foram seguidos por diarreia e distensão abdominal. Hipomotilidade e dilatação do intestino delgado, que estava cheio de gás, foram observados durante a laparotomia. Ao exame histológico, observou-se grande perda e degeneração de leiomiócitos das camadas musculares interiores e exteriores da parede intestinal, com acentuada hipertrofia e hiperplasia das células do músculo liso da lâmina própria e espessamento acentuado da muscularis mucosae com feixes orientados em direções diferentes e acentuada hipertrofia e hiperplasia dos leiomiócitos. A distribuição de leiomiócitos foi caracterizada por imunoistoquímica. Estes resultados suportam o diagnóstico de pseudo-obstrução intestinal em um Pug, associado à degeneração e perda de leiomiócitos da camada muscular.

Cell proliferation markers in the transplanted canine transmissible venereal tumor / Marcadores de proliferação celular no tumor venéreo transmissível canino transplantado

Adult male mongrel dogs were subcutaneously transplanted with the canine transmissible venereal tumor (TVT) on the hypogastric region. Twelve specimens of tumors were collected, half during the proliferative phase and the other half during the regressive phase. Fragments of the tumor were fixed in 10 percent buffered formalin and routinely processed for light microscopy. Sections of 4µm were stained by Schorr or AgNOR or either immunostained for MIB1 (Ki67). Schorr stain, AgNOR and MIB1 showed an increased proliferative activity through mitotic index, nuclear argyrophilic protein stain and cycling tumoral cells in the growing tumors, respectively. All of the three cell proliferation markers were able to distinguish the TVT in both evolution phases. MIB1 monoclonal antibody was the best in the morphologic evaluation of growth and regression of TVT. This resulted in higher values than AgNORs counting and mitotic index. MIB1 immunostaining was the most effective parameter of the proliferative activity of TVT. However, a significant correlation has been detected only between mitosis counting and AgNORs.

Cães machos, adultos, mestiços, foram transplantados com células do tumor venéreo transmissível canino (TVTC), na região hipogástrica. Foram coletados doze espécimes do TVTC, sendo metade durante a fase proliferativa e metade durante a fase regressiva. Fragmentos do tumor foram fixados em formol a 10 por cento, tamponado e processado rotineiramente para microscopia de luz. Secções de 4µm foram coradas pelo Shorr, ou pela AgNOR, ou ainda, imunocorado para MIB 1 (Ki67). As colorações pelo Shorr, AgNOR, ou MIB 1 mostraram um aumento do índice mitótico, coloração da proteína argirofílica nuclear e células tumorais ciclando em tumores em crescimento, respectivamente. Todos os três marcadores de proliferação celular foram capazes de distinguir o TVTC em ambas as fases de evolução. O anticorpo monoclonal MIB 1 foi o melhor na avaliação morfológica, de crescimento e regressão do TVTC. Isto resultou em um valor maior que a contagem de AgNOR e do índice mitótico. A imunomarcação com MIB1 foi o parâmetro mais efetivo da atividade proliferativa. No entanto, só foi observada uma correlação positiva entre a contagem de mitose e a AgNOR.

Enteric pathology and Salmonella-induced cell death in healthy and SIV-infected rhesus macaques.

The goal of this study was to morphologically characterize a ligated ileal loop model of Salmonella enterica serotype Typhimurium infection in rhesus macaques (Macaca mulatta) and to verify the occurrence of Salmonella-induced cell death in vivo. Eight adult healthy male rhesus macaques were used for ligated ileal loop surgery. Four macaques had been intravenously inoculated with simian immunodeficiency virus (SIV) mac251. Ileal ligated loops were inoculated with wild-type (WT) S. Typhimurium strain IR715 (ATCC14028 nal (r)), an isogenic noninvasive mutant strain (ATCC14028 nal (r) ΔsipAΔsopABDE2), or sterile Luria Bertani broth. Loops were surgically removed at 2, 5, and 8 hours post-inoculation (hpi). Intestinal samples were processed for histopathology, immunohistochemistry for detecting Salmonella, terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL), and transmission electron microscopy. Combined histopathology scores were similar between SIV-infected and control macaques. As expected, the invasion-deficient mutant was less pathogenic than WT S. Typhimurium. Neutrophil infiltrate in the intestinal mucosa correlated with bacterial loads (r = 0.7148; P < .0001) and fluid accumulation (r = 0.6019; P < .0001) in the lumen of the intestinal loops. Immunolabeled WT S. Typhimurium was observed in the epithelium and lamina propria at the tip of the villi at 2 hpi, progressing toward deeper lamina propria at 5-8 hpi. Most TUNEL-positive cells localized to the lamina propria, and some had morphological features of macrophages. Ultrastructurally, bacteria were observed intracellularly in the lamina propria as well as within apoptotic bodies. This study provides morphological evidence of Salmonella-induced cell death in vivo in a relevant nonhuman primate model.